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生物技术实验课程的设计

一、实验内容的选择

有针对性的选择适合于本校生物技术专业学生的实验内容,编写适合于本校学生的实验大纲和讲义。在实际教学过程中,我们将实验内容进行了全新的设计组合,将分子生物学实验课程从整体上设计为一个完整的、系统的大实验,其中包含不同实验技能的小实验,每一个具体的小实验之间既相互独立,又相互联系。目前,分子生物学发展日新月异,分子生物学实验技术也因为新技术的不断涌现而发生了巨大变化,分子生物学中许多实验方法与现今生产技术手段、合成制备途径、现代分析方法差距较大,达不到提高产率、节约环保的新要求[4]。因此,对分子生物学实验内容的选择,还包括不同实验手段的选择。在选择最适合的实验内容的前提下,大胆剔除一些过时、被新技术淘汰的技术手段。适当增加一些科技含量高、实验性强的内容,有针对性地减少验证性实验内容,增加综合性和设计性实验内容,以锻炼学生的综合实践能力[5]。实验总体设计是使用微生物作为试材,解决外源DNA在大肠杆菌中的表达载体的构建,这也是分子生物学实验最核心的部分和最广泛应用的部分。外源DNA是本专业老师课题研究中使用的某一完整基因片段,选择这样的基因并向学生说明该课题的总体设想,让学生了解我们所学的实验技术是解决重要生物学问题的必要手段。具体实验包含质粒DNA的提取和纯化、琼脂糖凝胶电泳分离、DNA分光光度法测定DNA的浓度和纯度、限制性核酸内切酶的酶切与鉴定、从琼脂糖凝胶中回收DNA片断、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化、PCR基因扩增技术、DNA的重组技术等实验。同时,我们选用目前应用最广泛的实验手段,比如质粒的提取纯化采用离心柱法、大肠杆菌的感受态制备采用经典氯化钙处理、化学转化等。通过这一套系的实验,学生们既掌握了分子生物学基本的操作技能,也了解了完成外源DNA在宿主细胞中表达的整套实验方案。

二、实验教学方法的实践

分子生物学实验操作的特点比较突出,不同于以往的物理、化学实验,分子生物学实验的操作对象是看不见摸不着的分子,学生不容易通过实验有直观的印象,所以不利于学生对实验原理的理解和掌握。另外,分子生物学实验操作精细,药品用量微少,仪器设备比较精密,所以,没接触过分子生物学实验的学生容易产生困惑,不知从何下手,针对分子生物学实验的这些特点,在实验教学手段上我们多方面着手,加深学生对实验原理的理解和实验过程的掌握。(一)利用生动的图片和模拟动画。在分子生物学理论教学过程中,积累了大量的图片和动画,用以演示分子活动过程。比如,对于PCR这个过程,学生们不容易理解,就给同学们在黑板上演示其步骤,同时辅以动画,让学生真正地了解PCR过程的基本原理。(二)近距离演示实验。分子生物学实验过程中会大量的涉及微量操作,教师在进行演示的时候,做到近距离手把手演示,让他们了解如何精准的量取适量的试剂进行试验。在分子生物学中,很多实验都是在体外模拟生物体内的条件来进行,因此,每一个反应样品都需要加入多种试剂进行反应。仍以普通PCR反应为例,所需试材包括:模板DNA、上下游引物、dNTP、聚合酶、缓冲液、去离子水等六种,在进行演示实验的时候,每加入一样试材,告知学生加入的目的,加深学生对实验原理的进一步了解。另外,近距离演示实验还可以规范学生的实验操作,比如高速离心机使用时的配平问题是规范使用离心机的关键;提取质粒时,当加入溶液I重选菌体后,加入碱性裂解液溶液II时,必须缓慢颠混,这是质粒能否提取出来以及提取纯度高低的关键等。因此,对这些基本操作的规范化指导,有助于培养学生良好的实验习惯,为以后的工作提供良好的研究思维和动手能力[6]。(三)合理安排。设计的分子生物学实验总的来说是一个大实验,所以,既要注重学生由浅入深的认知规律,又要把握整个实验的连续性。分子生物学另一个特点就是有的实验需要长时间的等待,所以合理进行实验安排非常重要,包括的对实验顺序的安排和对实验时间的安排。比如感受态的制备和转化实验,需要在第一天晚上将制备感受态的细菌接种,过夜振摇培养。同时将需要转化的DNA片段和质粒片段进行过夜连接。第二天一早,再次以1%接种到新鲜培养基中,约4个小时振摇培养后,细菌的OD值约0.4-0.6之间,即细菌处于对数生长期,用于制备感受态细胞。同时将连接体系取出置于4℃冰箱备用。感受态细胞制备好以后,以连接体系做转化实验。慢速振摇1小时后,涂平板筛选。第三天一早鉴定实验结果。这样合理的安排时间避免了不必要的等待。实验安排紧凑,有利于学生了解各实验之间的有机联系。

三、实验考核方式

在实验教学过程中,传统的实验考核方式,比如实验报告的提交等,暴露出许多弊端,许多学生完全是为了应付差事,在收上来的实验报告中,常出现全班同学只有两、三个版本的状况,即有两三个成绩较好的同学自行完成,而其他同学则抄袭了事。为了杜绝这种现象的发生,让学生的成绩真正反应学生的水平,将实验报告的成绩降低为30%,并采取雷同扣分制。在实验操作过程中随机提问,根据学生的实际操作情况、对所做实验原理的了解程度,以及实验后对实验的复述情况,给出学生60%的成绩。另外,考勤占总成绩10%,出勤情况从一个方面反映学生对实验的重视程度以及责任感。四、结语本校的生物技术培养方案旨在培养掌握生物技术的吉林化工学院学报》杂志简介详见.)

作者:葛雅琨 张元新 温钢 单位:吉林化工学院 化工与生物技术学院


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