1微球形态观察及粒径测定
取干燥微球经生理盐水溶胀15min后置于载玻片上，吸取1滴1%(V/V)Tween-80水溶液均匀涂布在微球表面。盖上盖玻片后置于显微镜下观察微球形态。于显微镜下随机取5个视野，每个视野中测定10个微球粒径，取算数平均值，计算标准偏差SD。
2溶胀率的测定
精密称取50mg干燥微球倒入100mL锥形瓶中，加入50mL生理盐水，转移至恒温振荡培养箱中，在37℃、150r•min－1的条件下恒温振荡。间隔取样，记录溶胀后的微球质量并计算溶胀率。溶胀率/%=Wt－W0/W0×100%Wt:溶胀后微球质量;W0:溶胀前微球质量。
3药物体外释放实验
31药物含量测定分析方法专属性
在200～800nm内分别对ＲFPT、Na+-ALG、AMBA溶液进行全波段扫描。可以看出ＲFPT在334nm处有最大吸收，在该波长处微球辅料对药物含量测定无干扰，见图1。
3.2药物体外释放标准曲线的绘制
称量4.0mgＲFPT，用适量无水乙醇溶解，置于20.0mL棕色量瓶内，用生理盐水定容，作为ＲFPT母液备用。取适量ＲFPT母液连续对半稀释为梯度浓度溶液，在波长334nm处测定吸光度。以吸光度(A)与质量浓度(ρ，μg•mL－1)进行线性回归。得到回归方程:A=0.085ρ+0.2245(r=0.9988)，线性范围为3～8μg•mL－1。
3.3稳定性试验
取一定量的ＲFPT/Na+-ALG混悬液稀释为不同浓度的ＲFPT/Na+-ALG稀释液(供试品1)，在稀释液中加入一定量的AMBA溶液得到AMBA-ＲFPT/Na+-ALG稀释液(供试品2)。取2种供试品溶液，分别于0，1，2，3，5，7d中的固定时刻在波长334nm处测定吸光度，ＲSD为0.37%(n=6)及0.39%(n=6)，表明该测定方法在7d内稳定。缓释性能评价指标载药量和包封率称取5mg微球，加1mL蒸馏水浸泡30min，加入破壁液［6］(0.06mol•L－1Na3C6H5O7•2H2O，NaHCO3调pH7～8)研磨至均匀胶浆，用生理盐水定容至50mL。取上清液1mL在334nm下测定吸光度，计算其浓度，计算载药量和包封率。药物体外累积释放率称取5mg微球，加入透析袋中，以生理盐水为释放介质，采用透析法测定药物释放度。设定恒温水浴震荡器温度37℃，转速150r•min－1。间隔取样5mL，同时补充等量释放介质。取出的待测样品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤，在334nm下测定吸光度，并计算药物的累计释放率。
4结论与展望
本实验制备了一种新型海藻酸钙利福喷丁载药微球，载药量51.5%，包封率89.3%。对氨甲基苯甲酸-海藻酸钙微球是一种优良的缓释、靶向，抗溶蚀药物载体材料。在肺部疾病的靶向治疗过程中，与纳米微球相比［11］，该微球的粒径大小以及海藻酸材料本身所具有的良好黏附性，使得该微球可以更牢固地吸附在支气管和肺部病灶附近，防止微球脱落或随气流被呼出，肺部沉积率高。这在今后临床应用方面将具有明显的优势。海藻酸钙微球制备过程中，对氨甲基苯甲酸的引入，提高了海藻酸钙微球交联的效果，起到改善载药微球的柔韧性和化学稳定性的作用。不仅能够抑制海藻酸钙载药微球在单价金属阳离子溶液中的溶蚀以及突释效应，改善包载药物的释放效果，起到平稳、长效、缓释的局部给药目的，并且对氨甲基苯甲酸作为一种止血药物，应用于辅助治疗结核病发病过程中出现的组织血液渗出，大咯血等，可以起到与凝血因子相类似的治疗效果［12］。虽然作为一种用于减少结核病治疗给药剂量、给药次数的支气管局部长期缓释载体材料，对氨甲基苯甲酸-海藻酸钙微球已经展现出了一定的临床应用价值，可以在一定程度上避免口服给药方式剂量大、周期长、肝毒性大，长期服用易耐药［13-14］等缺点。然而在目前的研究中还存在许多不足，未来还有许多进一步的工作要做。其中，对氨甲基苯甲酸与海藻酸钠分子的结合位点以及相应的结合机制尚未研究透彻，并且以载药微球包载多种结核病药物达到目前临床联合用药效果仍需假以时日。
作者：宋宏锐 张广宇 单位：沈阳药科大学制药工程学院 解放军第三〇九医院结核病研究所
相关专题：人民币升值贬值的影响 医学论文发表网
