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生物技术方法在自身免疫性疾病的应用

自身免疫性疾病是一种和机体自身免疫相关,血清中可以出现多种自身抗体并由此引起多系统多脏器受累的多样化疾病。临床上常见的自身免疫性疾病主要有:系统性红斑狼疮、干燥综合征、进行性系统性硬化病等,患者发病后临床症状显著,患者如果不采取积极有效的方法治疗将会诱发其他疾病,严重者将威胁其生命[1]。目前,临床上对于自身免疫性疾病尚缺乏理想的诊断方法,常规方法虽然能够帮助患者诊断,但是临床误诊率或漏诊率较高。近年来,生物技术方法抗核抗体谱在自身免疫性疾病诊断中广为使用,且效果理想,该方法能够帮助患者确诊,为患者临床治疗提供依据[2]。为了探讨生物技术方法在自身免疫性疾病诊断中的应用效果。选取2013年7月至2015年2月我院收治的113例自身免疫性疾病患者资料进行分析,报道如下。

一、资料与方法

1.一般资料:选取2013年7月至2015年2月我院收治的113例自身免疫性疾病患者资料进行分析,将其设置为实验组,患者中男66例、女47例,患者年龄为15~79岁,平均年龄(42.7±3.1)岁,患者中21例SLE、59例MCTD、10例SS、5例PSS、18例PM/DM,入选患者均符合美国风湿病歇会临床诊断标准。选择同期入院的93例非自身免疫性疾病患者为对照组,患者中男57例、女36例,患者年龄为17~85岁,平均年龄(46.5±2.7)岁,患者中,12例肾病,16例血液病、9例皮肤病、15例甲状腺疾病、18例糖尿病及23例肝炎。患者对诊断方案、护理措施等有知情权,患者年龄、病程等差异不显著(P>0.05),具有可比性。2.方法:入选患者均采用生物技术方法检测患者抗核抗体谱,方法如下:入选患者在入院第2天早晨空腹抽取3ml静脉血,静置30min后以离心半径为10cm,进行8min离心,离心速度为3500r/min。采用免疫印迹法对患者进行抗核抗体谱检测,试剂盒为德国生产提供,诊断相关操作步骤必须严格遵循说明书进行。首先,按照一定的比例稀释血清进行相应的抗原抗体反应,然后加入酶标抗体进行反应,最后加入显色剂显色,对于结果中出现一条黑色标志线者,标本判定为阳性,反之则为阴性[3]。3.统计学方法:采用SPSS16软件分析,计数资料行卡方检验,采用n(%)表示,计量资料行t检验,采用均数±方差(x珋±s)表示,P<0.05表示具有统计学意义。

二、结果

1.不同自身免疫性疾病ANA谱阳性率检测结果比较:本次研究中,91例SLE患者ANA抗体阳性率分别为19.0%、42.9%、23.8%、33.3%、47.6%、28.6%、66.7%、9.5%、4.8%、4.8%以及0%,显著高于对照组(P<0.05);59例MCTD患者抗U1NP抗体、抗SSA抗体阳性率分别为50.8%和32.2%,显著高于对照组(P<0.05)等,见表1。2.SLE组和MCTD组患者ANA同时阳性率比较:本次研究中,SLE组四种抗体同时阳性率为14.3%,显著高于MCTD组(四种抗体同时阳性率为3.4%)(P<0.05),见表2。讨论自身免疫性疾病是临床上常见的疾病,这种疾病发病率较高,且随着人们生活节奏的加快其发病率出现上升趋势,患者发病过程中既有T细胞参与细胞免疫,同时也有β细胞活化产生的体液免疫,多种自身抗体的出现使得患者临床症状变得更加复杂化、多样化,传统的诊断方法虽然能够帮助患者确诊,但是临床误诊率或漏诊率较高,部分患者甚至错过了最佳治疗时机[4]。近年来,生物技术方法检测其抗核抗体谱在自身免疫性疾病患者诊断中广为使用,且效果理想。本次研究中,91例SLE患者ANA抗体阳性率分别为19.0%、42.9%、23.8%、33.3%、47.6%、28.6%、66.7%、9.5%、4.8%、4.8%以及0%,显著高于对照组(P<0.05);59例MCTD患者抗U1NP抗体、抗SSA抗体阳性率分别为50.8%和32.2%,显著高于对照组(P<0.05)等。生物技术方法检测其抗核抗体谱和其他诊断方法相比优势较多。抗体谱中抗dsDNA抗体是目前临床上公认的SLE高度特异性抗体,已经被列为SLE诊断标准之一[5]。根据相关研究结果显示[6]:抗rRNP抗体和中枢神经系统、肾脏受累关系密切,并且经过动物实验结果显示:抗α-DNA抗体、抗核小体抗体与早期狼疮肾炎的形成有着紧密的联系。抗阻蛋白抗体虽然不具有诊断的特异性,但是能够参与狼疮肾炎的发病。同时,抗SSA抗体、抗SSB抗体是SS的特异性抗体之一。实验结果说明:抗SSB抗体是SS特异性抗体,抗SSB抗体仅在少数SLE患者中出现,并且阳性率一般在10%~15%,并且通过不同指标的联合检测能够有效的提高SS的临床确诊率[7]。临床上,在进行ANA荧光法和ANA印迹法检验时可能存在的一定的差异,出现这种结果可能和检验方法的局限性有关。IIF检验操作相对比较方便,并且灵敏度较高,检验范围比较广,能够作为ANA的筛查试验,但是抗原成分相对比较复杂,很难作为自身免疫性疾病的特异性抗体,临床诊断相对比较困难。假阴性结果可能和检测干扰、人体免疫反应以及部分患者靶抗原分布不均匀等关系密切,从而造成方法检测的局限性,引起漏诊或误诊率。根据相关实验结果显示:人类组织培养细胞作为底物时SLE血清的阴性率为2%[8]。同时,IIF法还容易引起抗Ro-52、抗SS-A等抗原的漏诊。而生物技术方法在进行抗核抗体谱检测时能够在反应膜上平行包被多种高纯化或重组的抗原,能够检测多种自身免疫性疾病相关的自身抗体,敏感度相对比较高,检测速度也相对比较快。但是,该生物技术方法尚不能覆盖患者体内存在的多达上百种自身抗体,并且靶抗原能力相对比较弱。本次研究中,SLE组四种抗体同时阳性率为14.3%,显著高于MCTD组(四种抗体同时阳性率为3.4%)(P<0.05)。综上所述,自身免疫性疾病患者采用生物技术方法检测其抗核抗体谱效果理想,能够提高临床诊断率,能够为患者后续治疗提供依据,值得推广使用。

作者:傅美丽


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