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病毒感染免疫检验研究

1病毒感染的作用机制

作为一类寄生类生物,病毒主要利用宿主细胞内的物质进行自身的复制,严重的影响了宿主细胞的正常功能,同时可通过感染体内具有免疫功能的细胞,减少免疫活性物质的表达,降低了在体内的正常浓度;也可以通过作用与非免疫应答的组织及其器官的途径对免疫功能造成损伤,是机体的免疫系统处于一种亚健康状态。而病毒对机体的免疫损伤的机制很多[1],①通过激活寄主细胞抹上的补体及其通过毒作用使病毒编码的蛋白质进行表达,过程中对感染的细胞进行损伤;②特异性的CTL通过对膜抗原的识别,增强自身的损伤性;③通过自身的抗原与抗体发生符合反应对具有路过功能的基膜及其血液流速缓慢的部位造成损伤;④在免疫应答的过程中,通过对补体的激活引发一系列炎性反应[2]。

2早期病毒感染免疫检验

2.1免疫荧光实验:采用免疫标记,将具有荧光效应的元素与已知抗体进行结合,抗原在于抗体结合的过程中,也具有荧光效应,通过在显微镜下对荧光物质的观察来鉴别抗原的种属。因为,具有荧光效应的元素也具有与蛋白质类抗体结合的功能,同样的方法可对抗体进行检测。2.2血细胞凝集实验:血细胞具有凝聚现象,而病毒感染的红细胞的凝集反应实则是病毒表面的抗原与红细胞表面抗体结合的反应,结果是血沉加快。可用于病毒的定量测定。若在抗体存在的情况下,则血沉则减慢,对于病毒的检出有着一定的灵敏度。而对于其抑制实验的原理则是因抗体的出现抑制了病毒与红细胞的结合,但是本实验具有一定的局限性,只针对梅毒病毒感染。2.3酶联免疫吸附试验:通过对免疫反应的特异性和催化作用结合,利用已知的抗原或者抗体的吸附能力将酶标记的抗原抗体反应在平板上进行,通常采用双抗夹心法和间接吸附实验两种方法。前者应用于病毒的早期阶段,后者主要应用于动物方面的检测。2.4中和实验抗原:分别固定血清-稀释病毒和固定病毒-稀释血清的方式对病毒的感染能力进行检测。因病毒在遇到血清后感染能力会降低,可通过对其感染能力的测定来衡量免疫血清的功能。主要用于病毒的种属及其抗原性的鉴别。2.5免疫电泳实验:因为抗原与抗体均为带电体,可通过外界的电场,对不同物质速度及其运动粒子数量的统计,来鉴别病毒的种属。

3近期病毒感染免疫检验

3.1发光免疫实验:通过将发光化学物质与机体免疫相结合,是一种通过光反应来检测待测物的组分和反应浓度的一种微量化,无放射性的新兴的检测方法,且日渐成熟,能够取代2.1和2.3这两项相关免疫检查。同时,本方法具有无毒无害的特点,并且耗时短可在安全的环境下进行操作。3.2重组免疫实验:对于HCV和HIV的检测有很高的临床价值,前者因有非结构性、结构性和核心成分的三种抗原,较其他相对复杂。此法较较2.3可将不同抗原以横线式的方式于硝酸和纤维素膜的横条相结合,置于反应盘后,若出现底物显色反应则说明待测血清中有针对性的抗原成分。3.3胶体金技术:该技术是将胶体金标记在抗原抗体反应的一种新兴的技术。标志物是在氯金酸在还原剂的作用下聚集而成,若于蛋白质结合则会影响其药物活性。将其与其他物质将诶和则会发生其特有的生理反应,目前广泛的应用于很多领域,临床上多用于HIV和AFP的探查。

4结果

将两个不同时期的检验过程中的涉及到的操作、耗时,实验结果的灵敏度及其特异度兼并全程操作的危险系数进行对比,结果显示,现阶段采用的免疫检验技术较早期方法具有操作更加简单、时程短、灵敏度和特异性高,同时危险性低,见表1。

5讨论

对于病毒感染的检查,目前临床上多采用免疫检验的方式进行鉴别诊断。而随着科学技术的发展,免疫检验的技术也在不断地更新,本次实验将早期应用于病毒检验的免疫学方法与目前新兴的方法进行优势对比[3]。10年的一项病毒检验的研究表明,目前使用的病毒的免疫检验方法较早期方法更加的简便快捷,同时易于操作。本次研究表明,采用发光、重组和胶体金等免疫实验相对早期方法操作,摒弃了繁琐的操作步骤,耗时更短,验证了之前的理论[4]。同时本次实验将灵敏度和实验结果的特异性纳入观察,结果显示新兴的方法更加的灵敏且结果的特异性更高,同时评估全程操作的安全性,危险系数更低。尽管技术得到了提高,但是我们仍应看到临床工作中仍存在因个体原因导致的操作误差造成底物污染等情况,同时对标本的选取方面也存在着一定的误差,需要在日后的工作中注意改善[5]。

作者:王清华 单位:辽宁省朝阳市第二医院


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