1油菜蜂花粉不同萃取物的总抗氧化力(T-AOC)的测定
从油菜蜂花粉中得到的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、萃余物的总抗氧化力如图1所示。由图1可知，石油醚萃取物总抗氧化力活性最强，ΔA520值达0.36，乙酸乙酯萃取物活性其次，ΔA520值达达0.31，正丁醇萃取物、萃余物几乎没有总抗氧化力。表明油菜蜂花粉乙醇提取物中抗氧化活性物质主要集中在石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物中。
2油菜蜂花粉不同萃取物对小鼠抗氧化力的影响
从油菜蜂花粉中得到的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、萃余物4个部分对肝组织MDA水平和脑组织MAO活力影响如表1所示。从表1可见，与正常对照组相比，衰老模型组动物体重明显小于正常对照组，呈显著性差异(P＜0.05)，说明衰老模型组动物生长受到抑制，实验组中石油醚组、乙酸乙酯组与模型组相比有显著性差异(P＜0.05)，表明这2个部分对D-半乳糖衰老模型小鼠的生长有促进作用。石油醚脾脏指数明显高于衰老模型组，有显著性差异(P＜0.05)，而对照组和其他实验组的脾脏指数同样高于模型组，但是差异不显著(P＞0.05)。在小鼠肝组织MDA含量方面，与衰老模型组比较，石油醚组肝组织MDA水平明显降低，差异极显著(P＜0.01)。乙酸乙酯组能显著降低肝组织MDA水平(P＜0.05)。正丁醇组和萃余物组肝脏MDA水平与模型组相比都没有显著性差异(P＞0.05)，说明油菜蜂花粉乙醇提取物中的石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物能明显降低D-半乳糖诱导衰老模型小鼠肝脏MDA水平，提高衰老小鼠的抗氧化力。在抗小鼠脑组织MAO活力方面，石油醚组和乙酸乙酯组动物脑组织MAO活力与模型组相比明显降低(P＜0.05)，这说明石油醚组和乙酸乙酯组对降低D-半乳糖诱导衰老模型小鼠脑组织MAO活力有明显作用。正丁醇组和萃余物组与模型组相比MAO活力也有一定程度的降低，但是没有显著性(P＞0.05)。实验结果表明油菜蜂花粉的抗氧化性成分主要集中在石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物中。
3油菜蜂花粉中抗氧化性成分结构鉴定
石油醚萃取物经MCI、ODS反相色谱柱反复洗脱分离得到3个主要化合物，其薄层色图如图2。进一步分离纯化得到单体化合物，经1HNMＲ、13CNMＲ解析并参照相关文献［12－15］得出，化合物1为α-亚麻酸，化合物2为α-亚麻酸甘油酯，化合物3为3'-甲氧基-α-亚麻酸甘油酯。化合物2和3是α-亚麻酸衍生物。从乙酸乙酯萃取物中分离得到3个主要化合物，其单体化合物的薄层色谱图如图3所示。化合物经结构解析分别为化合物4:山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷，化合物5:槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，化合物6:山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。均为黄酮类物质［16］。
4结论
本研究以油菜蜂花粉90%乙醇提取物依次经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物以及萃余物4个部分，经总抗氧化力(T-AOC)、抗小鼠肝组织MDA水平和脑组织MAO活力的测定，得出抗氧化性成分主要集中在石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物中。经MCI、ODS等反相柱分离纯化得出，石油醚萃取物主要含α-亚麻酸，α-亚麻酸甘油酯，3'-甲氧基-α-亚麻酸甘油酯;乙酸乙酯萃取物中主要含有山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷，槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等成分。大量文献报道油菜蜂花粉具有很好的抗氧化活性，但大多仅进行体外抗氧化活性评价，没有明确抗氧化活性成分的具体结构。本研究以体内外实验相结合的方法找出油菜蜂花粉中抗氧化性成分，明确其所起的抗氧化作用并通过核磁鉴定出化合物结构。
作者：饶剑 吴盼盼 徐德平 单位：江南大学食品学院
