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原生质体制备|苏云金芽孢杆菌原生质体的制备及大质粒转化

本文作者:韩光杰;孙俊;李传明;刘琴;徐健;成功正常投稿发表论文到《江苏农业科学》2014年11期,引用请注明来源400期刊网!



【摘要】:研究苏云金芽孢杆菌原生质体制备与再生的最佳条件,为进一步提高原生质体转化率打下基础。通过酶解法对苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种工业生产菌株(Bacillusthuringiensisssp.kurstaki)2671原生质体的制备及再生条件进行了研究,考察了菌体生长状态、溶菌酶浓度、处理时间等影响因素,采用PEG法对大质粒进行原生质转化。结果表明,对数生长前期的菌体(培养3h),以SMML作渗透压稳定剂,溶菌酶浓度7mg/mL,40℃下酶解40min,原生质体生成量可达5.7×107个/mL,再生率可达14.1%。在此条件下,采用PEG法可将大质粒pLTV1-ep成功转化宿主菌,转化率为0.3CFU/μg。
【论文正文预览】:苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)是使用最为广泛的生物农药[1]。目前,已经从Bt的不同亚种中分离了超过100种杀虫晶体蛋白[2-3],但每个亚种的致病力又极其有限。插入外源基因构建工程菌是提高其杀虫效果的有效方法之一。Bourgouin等将球形芽孢杆菌的毒素基因成
【文章分类号】:S482.39
【稿件关键词】:苏云金芽孢杆菌原生质体制备转化
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【稿件标题】:原生质体制备|苏云金芽孢杆菌原生质体的制备及大质粒转化
【作者单位】:江苏里下河地区农业科学研究所;
【发表期刊期数】:《江苏农业科学》2014年11期
【期刊简介】:《江苏农业科学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊,江苏农业科学杂志具有正规的双刊号,其中国内统一刊号:CN32-1214/S,国际刊号:ISSN1002-1302。江苏农业科学杂志社由江苏省农业科学院主管、江苏省农业科学院主办,本刊为......更多江苏农业科学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6196/)投稿信息
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